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流式细胞分选仪(Flow cell sorter)
发布日期:2011-12-09 浏览次数: 字号:[ ]

 

 

仪器名称:流式细胞分选仪(Flow cell sorter)
型号:BD FACS AriaTM  SORP(Special Order Research Product)
一、仪器特点
    从BD厂家特订制型高端流式细胞分选仪(2011年2月下旬购置安装,3月正式启用),目前成为国际上最先进、性能最强的高速分选仪,内含六个激光器(可同时照射到流动室)、27个荧光探测器和2个散射光探测器、石英杯流动检测池,固定光路校准,配备多规格分选收集管,如EP管、5ml、15ml、微孔板(6、24、48、96、384孔)和载玻片、细胞温控装置(保持细胞低温状态)和ACDU装置等,分析软件高度自动化。能够同时检测单细胞上18色荧光、20个参数,可检测荧光素有FITC、PE、PE Tx Red、PE Cy-5、PerCP、PerCP Cy5.5、PE cy7、APC Cy7、Alexa 700、APC、hromomycine A3、Violet2、Violet1、Side Pop (Hoechest33342或Hoechest33258)、INDO 1 Blue、INDO 1 VIOLET、 YG PE Cy5、YG PE Tx Red、YG PE、Qdot800、Qdot700、 dot655、Qdot605、Qdot585、Qdot、Pac Orange、Am Cyan、Pac Blue、V500、V450D等。实现四路分选、微孔板分选(针对稀少细胞),每孔可接收任意数目分选细胞,最精确至每孔接种一个细胞(single)直接培养单克隆化生长。亦可载玻片上进行“点对点”分选之后可在荧光显微镜下观察形态;可配备AMO系统控制浮质,防止分选区内生物样品气溶胶污染。
    具体指标与性能如下:
    ◆ 六激光光源:分别为355nm(100mw)、404nm(100mw)、444nm(40mw)、488nm(100mw)、561nm(50mw)、639nm(40mw),通过软件可任意调节激光功率,这一点有别于其他型号仪器,灵活性很强。因该仪器石英杯检测池中激发染料,因此同样激发功率下检测信号远远强于空气激发信号,即使不需高功率激光也同样检测到较强荧光信号,而且用低功率激光更有利于保障分选细胞的活性,这就充分显示了该仪器的特性及其优越性。
    ◆ 探测器:27个荧光、2个散射光探测器,滤光片分别为
   (1)355nm激光探测器:450/50 530/30 670/50
   (2)404nm激光探测器: 450/50 525/50 560/40 585/42 610/20 670/30 710/50 780/60
   (3)444nm激光探测器:515/20 525/50 610/20
   (4)488nm激光探测器:488/10  525/50  582/15  610/20 660/20 685/35 710/50 780/60
   (5)561nm激光探测器: 582/15 610/20 660/20
   (6)639nm 激光探测器: 670/30 710/50 780/60
    ◆ 技术指标:获取细胞速度100000个/秒,分选速度70000个/秒,分选纯度99%以上;回收率>80%。荧光检测灵敏度<125MESF;前向散射光灵敏度0.2μm颗粒。
    ◆ 数字化处理系统:分辨率262,144道,分选精度1/32液滴。
    ◆ 软件自动化程度高:实现自动补偿、手动补偿和脱机补偿。
    ◆ 液流自动控制系统,按软件自动清洗程序清洗液路,自动混匀样本。
    ◆ 样本和分选细胞冷却系统。
    ◆ 喷嘴规格:70μm、85μm 、100μm、130μm,陶瓷材料,能够满足绝大多数生物细胞分选需求。

二、主要检测项目
    ● 肿瘤干细胞分析与分选:SP细胞(side population)
    ● 各种干、祖细胞分析与分选:造血干细胞、胚胎干细胞、神经干细胞等,分选之后可以继续培养、直接进行原位杂交、RT-PCR等后续研究。
    ● 微孔板内“点对点”单克隆细胞分选:利用ACDU装置进行,适用于各种干细胞、肿瘤细胞分选,在96孔或384孔板的每个孔内最精确地接种一个细胞(single cell),实现一个细胞单克隆化生长,也可接种几个至上千万个细胞,孔板分选细胞数目由用户自行决定。
    ● 同时分析与分选18色以内多色荧光标记样品:如同时检测细胞表面、胞浆和胞核里的多种抗原、蛋白分子、核酸信息等。
    ● 染色体分析与分选:人或动物染色体分选(22对常染色体和一对性染色体)。
    ● 转染GFP、RFP细胞的分析与分选。
    ● DNA分析与分选:用Hoechest33342或Hoechest33258等染料标记活细胞上DNA,分析细胞周期,并可分选G0/G1期、S期或G2/M期细胞,获得不同周期中的活细胞进行生物学功能检测。
    ● 细胞活性的检测:细胞内活性氧的水平、细胞内Ca2+水平、线粒体膜电位、细胞内pH值等检测。
    ● 细胞表面和细胞内的各种细胞因子检测。
    ● 凋亡细胞检测:可利用Annexin V-PI双染法、BrdU法、caspase-3法等。
    ● 胎儿红细胞分选:便于产前诊断研究。




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